Cassette rapide d'essai de syndrôme respiratoire aigu grave de TUV

Kit diagnostique acide nucléique nouveau du syndrôme respiratoire aigu grave (2019-nCoV)

 

(Investigation d'ACP-fluorescence)

 

Utilisation prévue

 

Le kit diagnostique acide nucléique nouveau du syndrôme respiratoire aigu grave (2019-nCoV) (investigation d'ACP-fluorescence) est employé pour la détection qualitative des gènes d'ORF1ab et de N du syndrôme respiratoire aigu grave nouveau (2019-nCoV) dans l'écouvillon nasopharyngal, l'écouvillon oro-pharyngé, le fluide de lavage alvéolaire, le crachat, le sérum, le sang total et les résidus des cas suspectés de pneumonie avec l'infection nouvelle de syndrôme respiratoire aigu grave, les patients avec les groupes suspectés d'infection nouvelle de syndrôme respiratoire aigu grave, et d'autres patients ayant besoin du diagnostic ou du diagnostic différentiel de l'infection nouvelle de syndrôme respiratoire aigu grave.

 

Pour l'usage diagnostique in vitro seulement. Pour à usage professionnel seulement.

 

 

Principe d'essai

 

En appliquant la technologie quantitative de la fluorescence en temps réel RT-PCR sur l'instrument quantitatif d'ACP de fluorescence, cet essai utilise le syndrôme respiratoire aigu grave nouveau (2019-nCoV) ORF1ab et l'ordre conservé spécifique de coder le gène de la protéine N de nucleocapsid comme régions de cible qui sont conçues pour l'ordre conservé des gènes de double-cible, pour réaliser la détection de l'ARN témoin par les changements fluorescents de signal.

 

Les utilisations de système de détection d'ACP le contrôle interne positif, qui surveille la présence des inhibiteurs d'ACP dans des spécimens d'essai en détectant si le signal de commande interne est normal, d'éviter un résultat de faux négatif.

 

Composants du kit diagnostique

 

Ce kit est un réactif de réaction d'amplification et contient les composants suivants :

 

Non.	Nom de réactif	Spec. et quantité		Ingrédients principaux
		24 T	48 T
1	mélange 2019-nCov-PCR	624µL/tube X 1	1248µL/tube X 1	Premiers ministres (4,62%), sondes (1,15%), dNTPs (3,85%), mgcl2 (0,77%), Rnasin (0,48%), tampon d'ACP (89,13%)
2	mélange 2019-nCov-PCR-Enzyme	96µL/tube X 1	192µL/tube X 1	Enzyme de droite (62,5%), Enzyme de Taq (37,5%)
3	contrôle 2019-nCov-PCR-Positive	500µL/tube X 1	500µL/tube X 1	ARN Transcriptional in vitro contenant les gènes de cible (gène d'ORF1 ab, de N) et les fragments standard internes de gène (RNase P)
4	contrôle 2019-nCov-PCR-Negative	500µL/tube X 1	500µL/tube X 1	Salin normal

 

 

Méthode d'essai

 

Préparation du réactif (exécuté « à la région de préparation de réactif ")

 

Sortez chaque composant du kit diagnostique et placez-les à la température ambiante. Permettez aux réactifs d'équilibrer à la température ambiante, puis au vortex chacun d'eux respectivement pour une utilisation ultérieure.

 

Selon la quantité de spécimens d'essai, le contrôle 2019-nCoV-PCR-Positive et le contrôle 2019-nCoV-PCR-Negative, la quantité appropriée de pipette du mélange 2019-nCoV-PCR et le mélange 2019-nCoV-PCR-Enzyme (mélange 2019-nCoV-PCR mélange 4μL/test d'ACP-enzyme 26μL/test + 2019-nCoV-), les mélangent complètement pour faire un ACP-Mastermix, le centrifugent instantanément pour une utilisation ultérieure.

 

Article	1 échantillon	10 échantillons	24 échantillons	48 échantillons
mélange 2019-nCoV-PCR (μL)	26	260	624	1248
mélange 2019-nCoV-PCR-Enzyme (μL)	4	40	96	192
Note : La configuration ci-dessus est juste pour votre référence et pour assurer assez de volume du l'ACP-Mastermix, plus de volume d'introduire à la pipette réel peut être exigé.

 

Transférez les réactifs au-dessus-préparés au « spécimen traitant la région » pour une utilisation ultérieure.

 

Amplification d'ACP (référez-vous au manuel d'utilisation de chaque instrument pour ajuster les arrangements.)

 

Tubes de réaction d'ACP d'endroit dans les puits de spécimen de l'équipement d'amplification. Installez le contrôle 2019-nCoV-PCR-Positive, le contrôle 2019-nCoV-PCR-Negative et les spécimens à examiner dans le nom correspondant de spécimen d'ordre et d'entrée.

 

La Manche d'essai choisie d'ACP :

 

a. canaux choisis de FAM (région d'ORF-1ab) et de ROX (gène de N) pour examiner l'acide 2019-nCoV nucléique.

b. canal choisi de SORTILÈGE pour examiner le contrôle interne.

 

Placez les paramètres de cycle

 

Non.	Étapes	La température	Temps	Cycle non.
1	Transcription inverse	50°C	30 mn.	1
2	predenaturation de cDNA	95°C	1 mn.	1
3	Dénaturation	95°C	sec 15.	45
	Collection de recuit, d'extension et de fluorescence	60°C	30 sec.*
4	Refroidissement de dispositif	25°C	sec 10.	1

 

Quand les arrangements sont accomplis, sauvez les arrangements et suivez la procédure de réaction.

 

Analyse de résultat (référez-vous au manuel d'utilisation de l'instrument pour ajuster les arrangements.)

 

Des résultats seront sauvés automatiquement quand des réactions sont accomplies. Analysez la courbe d'amplification de la cible de la détection et du contrôle interne. Ajustez les valeurs- de début, de fin et seuil de la ligne de base du graphique selon le résultat d'analyse (les utilisateurs peuvent ajuster les valeurs selon la situation réelle. La valeur de début peut être placée entre 3-15, et valeur de fin entre 5-20. Ajustez la courbe d'amplification du contrôle négatif pour être appartement ou au-dessous du seuil). Cliquez sur « pour analyser » pour mettre en application l'analyse, veillez chaque paramètre pour répondre aux exigences données dans « le contrôle de qualité 5. ». Allez à la fenêtre de « plat » enregistrer des résultats qualitatifs.

 

Contrôle de qualité

 

Article	contrôle 2019-nCoV-PCR-Negative	contrôle 2019-nCoV-PCR-Positive
Valeur de CT	Aucun Ct ou Ct > 40 au canal FAM, ROX et SORTILÈGE (Contrôle interne)	≤ 35 au canal FAM, ROX et SORTILÈGE (Contrôle interne)

 

 

 

 

 

 

 

Le résultat d'essai est traité en tant que valide si toutes les conditions dans le mentionné ci-dessus sont remplies pour le même essai. Autrement le résultat d'essai est traité comme invalide et doit être retesté.

 

Chaîne de référence

 

Par la recherche sur des valeurs de référence, la valeur de référence de Ct du gène de cible est déterminée pour être 40, la valeur de référence de CT du contrôle interne est déterminée à être 40.

 

Explication de résultat de détection

 

Conclusion	Résultats d'amplification
positif 2019-nCoV	Il y a courbe typique d'amplification de S-forme détectée au canal de FAM et/ou de ROX, et la courbe d'amplification qui est détectée au canal de SORTILÈGE, Ct≤40.
négatif 2019-nCoV	Il n'y a aucune courbe typique d'amplification de S-forme (aucun Ct) ou Ct > 40 détectés au canal de FAM et de ROX, et la courbe d'amplification qui est détectée au canal de SORTILÈGE, le ≤ 40 de Ct.

 

Il n'y a aucune courbe typique d'amplification de S-forme détectée au canal de FAM, de ROX et de SORTILÈGE (aucun Ct), ou au Ct > 40. On l'indique que la concentration du spécimen est si basse, ou il y a des substances parasites qui empêchent la réaction. Le résultat d'essai est invalide. Une enquête devrait être effectuée pour trouver et exclure les raisons, rassemble svp le spécimen encore et reteste les spécimens.

Note : Pour des cultures de virus, il n'y a aucune condition pour des résultats d'essai internes de contrôle.

 

 

Index de performance des produits

 

Exactitude

La référence positive d'entreprise d'essai, les résultats sont tous positive.

 

Spécificité

 

Pour le kit diagnostique acide nucléique nouveau du syndrôme respiratoire aigu grave (2019-nCoV) (investigation d'ACP-fluorescence), il n'y a également aucune réaction croisée avec le syndrôme respiratoire aigu grave (NL63, HKU1, 229E, OC43), le syndrôme respiratoire aigu grave de SRAS, le syndrôme respiratoire aigu grave de MERS, la grippe un virus, le type Yamagata de virus de la grippe B et le type Victoria, le virus de la grippe A (H1N1), le virus de la grippe A (H3N2), le virus de la grippe A (H5N1), le virus de la grippe A (H7N9), le type syncytial respiratoire A de virus et le type B, le type nasal A de virus, le type B et le type C, le type 1 d'adénovirus, 2, 3, 4, 5, 7 et 55, le type 1 de virus para-influenzae, 2 et 3, type intestinal A de virus, type B, type C (EV-C95), type D (EV-D70), virus pulmonaire partiel, virus humain de poumon, neoformans de cryptococcus, streptocoque pyogenic, baumannii d'acinétobactérie, carinii de pneumocystis, pneumoniae de klebsiella, streptocoque pneumoniae, Hemophilus influenzae, Pseudomonas aeruginosa, pneumophilia de legionella, bordetella pertussis, Staphylococcus aureus, pneumonie de pneumoniae de mycoplasma, streptocoque pneumoniae, pneumoniae de klebsiella, chlamydia, virus d'eb, virus humain de cytomegalo, fumigatus d'aspergille, albicans de candida, glabrata de candida, bacille de la tuberculose, mycobactérie non-tuberculeuse, norovirus, rotavirus, virus de zoster de varicella, virus de la rougeole, virus des oreillons, échantillons positifs humains d'ADN etc. de génome. Examinez la référence négative d'entreprise, le résultat sont tout négatifs.

 

 

Précision :

 

Le coefficient de variation (CV%) de la valeur de CT de la précision gérée par dans est ≤5%.

 

L'évaluation clinique est basée sur recommandent la méthode « de guide nouveau de technologie d'essai en laboratoire de pneumonie d'infection de syndrôme respiratoire aigu grave », « le programme de contrôle nouveau de cas de pneumonie d'infection de syndrôme respiratoire aigu grave (deuxième édition) » au diagnostic/au résultat d'exclusion comme comparaison, dans le Cademy militaire de l'institut de recherche médical militaire, lutte contre la maladie de Hunan et centre de prévention, l'hôpital des personnes de province de Hunan, hôpital central de Xiangya d'université du sud le 2ème, selon des données cliniques rassemblées des quatre établissements, tels que l'analyse statistique, l'évaluation préliminaire, clinique de base a confirmé la performance des produits peut répondre aux besoins de secours. Les types d'échantillons pour l'évaluation clinique ont inclus les écouvillons pharyngeal et le lavage alvéolaire. Encore d'autres données cliniques seront rassemblées après commercialisation pour confirmer la représentation clinique du produit.

 

En raison des caractéristiques de l'écouvillon et de tout autre processus de collection témoin et du procédé de viral infection lui-même, résultats de faux négatif peut être provoqué par le volume insuffisant témoin, qui devrait être combiné avec l'autres diagnostic et information cliniques de traitement pour le jugement complet, le contre-essai si nécessaire.

 

Stockage et stabilité

 

Le kit diagnostique devrait être stocké dans une poche scellée at-20±5°C et être protégé contre la lumière. Le kit est provisoirement valable 6 mois.

Veuillez se référer à la date de la date de fabrication et d'échéance sur le paquet externe.

Les réactifs maintiennent valide et stable dans la date d'échéance a sinon employé. Tant que le conteneur du réactif est ouvert, le gel/cycles de dégel ne devrait pas dépasser trois.

 

Instrument compatible

 

Le kit diagnostique s'applique à SLAN-96P, ABI7500, Life Technologies QuantStudio ^TM5, RocheCobas480, instrumentde l'ACPMA-6000.